高效液相色谱仪的维护与保养

一.输液泵的维护
1）试验室常用备件包括垫圈、0环、接头、凸轮、泵头、止回阀和连接件等。活塞和弹簧等不常换。
2）腐蚀性溶剂或缓冲液在泵内存放不可过夜，否则溶剂会对泵起腐蚀作用。使用腐蚀性物质后要冲洗，先用水后用甲醇。
3）每次更换溶剂都要有记录，若要搁置一段时间，则要记录最后一次所用的溶剂是什么。
4）避免电机过热，带电机的泵要定期加油。
5）不要使用挥发性很大的溶剂戊烷、乙醚），。这类溶剂在运行过程中易挥发而使系统产生气流泡。流动相在使用前要脱气，以免产生气泡。
6）经常检查压力限制开关，检查流速。
二.输液泵常见故障及排除方法：
1）既无压力指示，又无液体流过，可能是泵密封垫圈磨损，需更换，或有大量气泡进入泵体形成空穴，可泵工作的同时，用一个50ml的玻璃针筒在泵出口处抽气泡。
2）压力波动大，流量不稳定，系统中有空气或单向阀浸入盛有丙酮的烧杯内，用超声波清洗。
3）压力异常升高输液管被堵塞，如泵垫圈磨耗产生的细屑和缓冲液析出的盐等。多数在细径的管道和经过滤器处发生堵塞，需及时清除异物并彻底洗净。对流路系统中溶剂的置换，应以相混溶的溶剂逐步过渡，例如采取以下方式：缓冲溶液→←蒸馏水→←极性有机溶剂→←有机溶剂。
4）压力降低：系统有泄漏，如进样阀的接头由于反复拆装使不锈钢垫圈出现刻痕，以致漏液。故凡有接头螺帽处均以拧至不漏液为度，不宜过分拧紧，以免损坏接合处的密封。

三.进样阀的维护：进行阀注射孔的导管内端是一个聚四氟乙烯材料做的钵形垫圈（或平垫圈），作用是保证样品液全部注入系统而不外汇。导管不宜审批权得太紧，否则垫圈被挤压过度而封死，无法进样。
　　进样阀的通道十分微细，稍有脏物即易堵塞，所以，样品预先处理很重要。样品一定要溶解完全，同时避免注射浓深夜，以免残留液在进样阀内析出结晶引起堵塞，使系统压力异常上升。
四.色谱柱日常维护：
1）每次开机时，流速和柱压要逐渐加强，突增压会使柱庆受到冲击引起紊乱，产生空隙，使柱头凹陷。
2）在注射样品前要使色谱系统平衡。
3）可用皮肤是否有冷感加以判断。空气会从漏缝进入系统，引起基线漂移，影响峰高和峰面积的重复性。
4）不要把柱头拧得太紧，过紧易损坏接头螺纹引起渗漏。拧螺丝时使用的搬手应短些，不宜太长。
5）不要把柱子放在有气流的地方或直接放在阳光下，气流和阳光都会使柱子产生温度梯度，造成基线漂移。若怀疑基线漂移是由温度梯度造成的，可设法使柱子绝热，例如用恒温炉或恒湿水套使之恒温，也可用布或毛巾把柱子和接头包起来。
6）若仪器用来作常规分析，可配制一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。
7）若所注样品会污染柱子，可用适当的溶剂（几百毫升）慢慢冲柱子过夜。使用再用流动相重新平衡柱子30分钟。
8）装卸、更换、贮存需挪动柱子时，动作宜轻，不使其受到碰撞，以免柱床因震动而产生空隙或通道。
9）使用硅胶为基底的柱子，流动相的pH值一般不应＞8或＜2，pH＞8会使硅胶骨架溶解；pH＜2则键合相化学键易剥离。
10）色谱柱在使用过程 中，柱压逐步升高，可能有两个原因：①柱子被污染或有固体析出造成流路堵塞，②固定相颗粒被碎或骨架被溶解。解决的办法：①在分析柱前加一根短保洗柱（内径4×50mm），里面的填料应与分析柱相同；②避免使用碱性强的流动相；③如果柱头部分被污染，可将柱头部分变色的固定相刮去，另加一些新的作为补充。
11）柱要加标签，新旧分开，不要放大温差大的地方。